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123儀器商城文章中心之現代色譜的基本流程

2010-12-22

123儀器商城文章中心之現代色譜的基本流程
1、推動流動相前進的動力
GC是以氣體做流動相的色譜過程。做流動相的氣體稱為載氣。載氣裝在壓縮鋼瓶內或由氣體發生器產生，有控制閥件調成恒定的壓力。一些檢測器用的燃燒氣、助燃氣也用上面兩種方法他氣源。除載氣的入口和出口外，載氣是是運行在一個密閉的管路系統中。常用的載氣為氮氣、擬氣、氬氣和氫氣等。不同的檢測器選用不同的載氣要求載氣純度高，含量達到99.99%以上，載氣進入氣相色譜系統之前必須用分子篩和干燥劑除去水分和氧等雜質。
載氣的流量必須穩定，要用高精度的壓力調節器和流量控制器控制載氣的出品壓力和流速達到提高分離效能、降低噪聲的效果。
2引進樣品進入GC系統的進樣器
GC常用針筒式微型注射器-隔膜進樣器進樣，或者用平面閥進樣器進樣。進樣器都放在恒溫箱內，有助于樣品的氣化。除了氣體樣品外，液體樣品進樣到氣化室內被子加熱淚盈眶氣化后才能進入色譜柱內進行分離，沒有氣化的液體樣品中的待測組分是不能在色氣體為流動相的GC系統內獲得分離的。
隔膜進樣器也叫柱頭進樣器。用帶有圓錐形或斜口針頭的針筒式注射器進樣器；液體樣品進樣量為mL級，用0.25 ~ 10mL的針筒進樣器；液體樣品進樣量為uL級，用0.5 ~ 501uL的針筒進樣器；針筒式進樣是色譜初學者必須苦練的一項基本功，做到快速又準確。隔膜進樣器的隔膜是由特殊橡膠制成的，韌性好，柔軟而結實，在進樣器中起密封作用。針關刺穿隔膜進入到有壓力的流動相內進樣動作要快，否則載氣會沿著針芯向外擠壓樣品，每次進樣量不一樣，結果不準確。需要做到每次進樣的時針頭都刺穿在隔膜中心同一個點。如果刺偏了不但會損壞針頭，而且樣品會梯度氣化，色譜峰加寬。
隔膜進樣器精確度差，并且要定期更換橡膠隔膜、注射器或者注射器針頭。現在已逐步改用六通平面閥進樣器，可以在常壓下操作、不間斷連續進樣。無論手動進樣，還是自動進樣都十分方便。
雖然隔膜時樣器有缺點，但樣品用量少，能控制在nL級水平。這樣減少了色譜柱外效應，提高了分離組分間的分離度。有時候隔膜進樣還不失為一種好方法。
3、GC柱
色譜柱包括柱管和固定相。
GC分填充柱GC和毛細管GC。
4、GC的檢測器
色譜檢測器是檢測分離了的離開色譜柱組分的電子眼、攝像儀，是色譜測定結果的記錄，也是對測定組分定性定量的重要依據。
在2004年第25屆雅典奧運會上，中國運動員劉翔創造了110m跨欄世界紀錄12.91s。攝像任免拍攝了劉翔跨欄的全過程。色譜檢測器就好象運動場上的攝像儀。定性：中國運動員劉翔；定量：110m各賽段所跑的時間。